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茶氨酸,從樹葉到工廠

媒體:果殼網(wǎng)  作者:云無心
專業(yè)號:森林食品資訊 2016/6/13 16:48:19

優(yōu)質(zhì)的綠茶會有一種“鮮爽”的風(fēng)味。1950 年,日本學(xué)者酒戶彌二郎從綠茶中分離出了產(chǎn)生這種風(fēng)味的主要物質(zhì)——一種非蛋白質(zhì)氨基酸,命名為茶氨酸。茶中的茶氨酸都是左旋的,按照命名法記為“L-茶氨酸(L-Theanine)”。

Theanine.jpg

茶氨酸分離自茶葉 圖片來源:drugs-forum.com

此后的研究發(fā)現(xiàn),茶氨酸不僅為茶帶來鮮爽風(fēng)味,它本身還具有許多生理功能。比如它能突破血腦屏障直接影響大腦活動,從而對人的情緒產(chǎn)生影響。這種影響又可能在生理上對于人體健康產(chǎn)生積極作用。1964年,日本批準(zhǔn)了L-茶氨酸為食品添加劑使用,而美國FDA也在1985年給予了L-茶氨酸GRAS的分類。GRAS意為“一般公認(rèn)安全”,雖然與“健康價值”無關(guān),但意味著可以自由地用于各種食品中。在中國進展比較慢,直到 2014年7月18日,衛(wèi)計委終于批準(zhǔn)了它作為新食品原料。

那么,茶中有多少茶氨酸?又怎樣才能得到可以作為“食品原料”的茶氨酸呢?

茶樹如何合成茶氨酸?

在成熟的茶樹中,茶氨酸是在根部合成的。借助ATP提供的能量,谷氨酸和乙胺在茶氨酸合成酶的催化下合成茶氨酸。然后,茶氨酸被運輸?shù)叫卵恐蟹e累起來。如果光照充足、溫度較高,茶氨酸被分解成谷氨酸和乙胺,而乙胺被用于合成兒茶素。這個過程,跟茶樹的光合作用密切相關(guān)。

如果光照不足、或者溫度較低,那么茶氨酸的分解就會受到抑制,茶的芽和葉中就會積累比較多茶氨酸,而相應(yīng)的兒茶素含量就比較低。

如果茶樹的葉綠素不足,光合作用弱,茶氨酸的分解也會較弱,茶的芽葉中也會積累比較多的茶氨酸。

什么樣的茶富含茶氨酸?

作為飲料,“好茶”的根本標(biāo)準(zhǔn)還得是“好喝”,而茶氨酸以及游離氨基酸的含量與茶的風(fēng)味正性相關(guān)——也就是說,茶氨酸和游離氨基酸含量高的茶,往往會更好喝。

茶的芽葉中含有多少茶氨酸,茶樹品種至關(guān)重要。以茶氨酸含量高而著稱的茶樹品種中,白葉1號無疑是名氣最大的。1970年代,林業(yè)工作者在浙江省安吉縣發(fā)現(xiàn)了一棵樹齡超過百年的老茶樹。這棵茶樹的葉片在早春是白色的,氣溫升高之后逐漸恢復(fù)綠色。經(jīng)過無性繁殖,這棵茶樹得到充分推廣,成為了著名的“安吉白茶”。2004年,這個獨特的茶樹品種被正式命名為“白葉1號”。

白葉1號是一個溫度敏感的自然突變體。在早春低溫期間,其葉綠體的形成存在障礙,葉綠素合成受阻,以至于表現(xiàn)為白色。與這種突變相應(yīng)的,是細(xì)胞中蛋白質(zhì)解體嚴(yán)重,導(dǎo)致了游離氨基酸的含量顯著升高。同時,茶氨酸的分解也受到抑制,所以茶氨酸含量也很高。等到氣溫升高,白葉1號合成葉綠素的能力逐漸恢復(fù)正常,最后變成正常的綠色。

一般品種的鮮茶芽葉,游離氨基酸的含量占干重的3~4%,茶氨酸的含量占干重的1~2%。而在白葉1號中,游離氨基酸的含量超過干重的6%,其中茶氨酸大約一半,此外茶多酚只有常規(guī)品種的一半左右。茶多酚是茶中澀味的來源,高茶氨酸低茶多酚的白葉1號,制成的綠茶澀味低而鮮爽味濃郁,風(fēng)味比普通綠茶就要更好。

常規(guī)的綠茶中,也有一些茶氨酸比較高的品種,比如龍井43。在通常采摘的一芽兩葉的鮮葉中,游離氨基酸的含量接近干重的4%,而茶氨酸的含量超過2%。龍井43成為制作龍井茶的優(yōu)勢樹種,這可能也是重要的原因之一。近年來,中國農(nóng)科院茶葉研究所找到了一個葉綠素含量很低的突變品種,其葉綠素a和葉綠素b只有龍井43的14%和20%,所以芽葉呈現(xiàn)為黃色,被命名為“中黃2號”。中黃2號的新鮮芽葉中,游離氨基酸含量約為干重的7%,而茶氨酸的含量約占干重的4%,跟白葉1號差不多。

除了品種,溫度和光照也會影響到茶氨酸的分解。在關(guān)于茶的各種詩文中,優(yōu)質(zhì)的茶總是生長在深山幽谷。除了水源土壤的清潔,更重要的原因在于深山幽谷中光照不足,而在春天茶葉發(fā)育期間溫度較低,所以茶氨酸的分解以及兒茶素的合成受到抑制。這樣制得的春茶茶氨酸含量高而茶多酚含量低,也就更好喝。而夏茶和秋茶生長采摘時溫度較高,光合作用旺盛,相對而言茶氨酸含量低而茶多酚含量高,也就不如春茶好喝了。

日本人偏好綠茶。但日本沒有那么多深山幽谷來長茶樹,所以很拼的日本人通過“人工干預(yù)”來實現(xiàn)深山幽谷的效果。這就是日本綠茶特有的“遮蔭”處理。日本綠茶中名氣最大的玉露,需要在新芽開始形成時,用竹席、蘆葦或者帆布遮蓋起來,持續(xù)長達20來天。因為缺乏光照,茶樹會合成更多的葉綠素來補償,從而使得茶的鮮葉更綠,做出來的綠茶更好看。同時,茶氨酸的含量更高,茶多酚含量更低,也使得它風(fēng)味更好。當(dāng)年酒戶彌二郎分離茶氨酸,用的就是玉露茶。

從茶中分離茶氨酸

不管是作為食品添加劑、膳食補充劑還是食品原料,都需要純度較高的茶氨酸。中國批準(zhǔn)作為食品原料的茶氨酸對純度的要求是最低的,只要超過20%就可以。但這也大大高于茶中的含量——也就是說,把茶氨酸分離出來,是它實現(xiàn)這些用途的前提。

茶氨酸易溶于水,只需要用水浸泡就可以提取出來。但是,同時被溶解到水中的,還有茶多酚、咖啡因等各種其它成分。要得到純度高的茶氨酸,就還需要除去其它成分。好在茶氨酸很穩(wěn)定,能夠耐高溫、耐酸、耐堿,在漫長的提取與分離流程中,能保持不失活不分解。所以,各種提取和分離天然產(chǎn)物的手段盡可以輪番上陣,把“雜質(zhì)”逐漸去除,一步一步地提高純度。目前,工業(yè)上可采用的分離方法有三種:沉淀法、離子交換樹脂法和膜分離法。

沉淀法是最傳統(tǒng)的化工分離手段,就是通過變化溫度、加酸、加堿、加其它化學(xué)試劑等手段,把混合物中的一種或幾種成分充分地沉淀下來,從而把茶氨酸和其他“雜質(zhì)”成分分開。這種手段操作簡單,但需要的步驟很多,在加入化學(xué)試劑沉淀的過程中,也可能引入新的雜質(zhì),甚至有的雜質(zhì)中還含有有害成分。

離子交換樹脂法要高端大氣一些。大致流程是通過沉淀去掉蛋白質(zhì),再用吸附的方式去掉色素等成分,然后讓溶液流過離子交換樹脂,把茶氨酸吸附到樹脂上而讓其他成分流過。再改換水溶液的酸堿度,把茶氨酸“洗脫”下來,就得到了茶氨酸含量大大提高的“粗品”。這樣的粗品再經(jīng)過結(jié)晶純化,可以得到高純度的茶氨酸。純度高,自然成本也就比較高了。

膜分離是現(xiàn)代天然產(chǎn)物分離中的新興技術(shù)。分離使用的半透膜就象孔徑非常小的篩子,允許尺寸比孔徑小的分子通過,而把尺寸大于孔徑的分子攔下。通過不同孔徑的膜的組合,就可以把分子比茶氨酸大的和小的成分都去除,而只留下茶氨酸和分子大小與它接近的成分。膜分離的優(yōu)勢在于不再引入其他的物質(zhì),流程也比較簡單,劣勢是只能進行富集和初步純化,只靠它也還是難以獲得高純度的產(chǎn)品。

茶中的茶氨酸含量很低,如果從茶原料中只是分離茶氨酸的話,經(jīng)濟效益就比較低。而茶氨酸含量高的鮮葉,做成的茶葉往往品質(zhì)較高,能賣出更好的價錢,也就不大會用來提取茶氨酸。不過,茶中有經(jīng)濟價值的成分并不止茶氨酸,比如茶多酚,含量高、也更有市場吸引力。提取茶多酚產(chǎn)生的廢液中,茶氨酸并沒有受到影響。從這樣的廢液中提取茶氨酸,不僅原料成本幾乎沒有,還相當(dāng)于已經(jīng)去除了一些“雜質(zhì)”,成本也就大大降低。

工廠里生產(chǎn)茶氨酸

對于化學(xué)家來說,知道了茶氨酸的分子式,就可以去想辦法來合成。茶氨酸可以看成是谷氨酸與乙胺通過失去一個水分子連接而成的,就可以用L-谷氨酸(或者在反應(yīng)器內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化成L-谷氨酸的其他分子),加上乙胺(或能轉(zhuǎn)化成乙胺的分子),在適當(dāng)?shù)臈l件下讓谷氨酸和乙胺連接起來成為茶氨酸,然后再把它從反應(yīng)混合物中分離出來。

這種方式聽起來很簡單,但實現(xiàn)起來也不容易——沒有適當(dāng)?shù)拇呋瘎?,有機合成的效率低而且選擇性也不強——也就是說,反應(yīng)物并不是那么聽話地轉(zhuǎn)化成茶氨酸。此外,“化學(xué)合成”這個出身就注定了它會受到歧視。尤其是,化學(xué)合成出來的是L型和D型的混合物,跟天然茶氨酸中只存在L型也還是有區(qū)別的。

在茶樹內(nèi),茶氨酸是谷氨酸和乙胺在茶氨酸合成酶的作用下合成的。如果能這種酶用于化學(xué)合成,那么反應(yīng)就會高效得多??上н@不現(xiàn)實,這種酶極其不穩(wěn)定,無法制成純品再加入到合成反應(yīng)器中。人們只好退而求其次,開發(fā)出了微生物發(fā)酵法。這種工藝先是培養(yǎng)微生物,合成谷氨酰胺合成酶,然后模擬茶樹體內(nèi)環(huán)境,用ATP提供能量,讓谷氨酸和乙胺進行反應(yīng)。谷氨酰胺合成酶的“天職”其實是讓谷氨酸和銨離子合成谷氨酰胺。但如果反應(yīng)體系中沒有銨離子,那么它也能“狗拿耗子”,把乙胺弄到谷氨酸上去從而生成茶氨酸。也有一些其他酶通過其他原料來進行轉(zhuǎn)化得到茶氨酸的工藝。這些方法的優(yōu)點是副產(chǎn)物比較少,分離純化起來要容易一些。不過,它需要先培養(yǎng)細(xì)菌來生成酶,然后利用這些酶去干活。這需要保持酶的活性,還要精密控制反應(yīng)條件才能得到理想的結(jié)果。這對技術(shù)的要求比較高,生產(chǎn)流程比較復(fù)雜精密,對于工廠是相當(dāng)大的挑戰(zhàn)。

介于微生物發(fā)酵和從茶樹中提取之間的,是植物細(xì)胞培養(yǎng)法。這種工藝一般是把茶樹的愈傷組織細(xì)胞取來,加入到培養(yǎng)液中生長。通過調(diào)控培養(yǎng)條件,比如培養(yǎng)液的酸堿度、溫度、培養(yǎng)液成分,利用細(xì)胞中的茶氨酸合成酶來合成茶氨酸。這種方式得到的茶氨酸跟茶樹中的一樣都是L型,而且含量比較高。在文獻報道的試驗條件下,茶氨酸的含量超過干重的20%——這已經(jīng)達到了中國國家標(biāo)準(zhǔn)中作為“食品原料”的茶氨酸的純度要求。當(dāng)然,目前的國家標(biāo)準(zhǔn)中,規(guī)定了作為食品原料的茶氨酸來源于茶葉,而這種植物組織細(xì)胞培養(yǎng)法本身也還只在試驗研究階段。(編輯:游識猷)



作者:云無心
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